3．临床操作注意事项
DNA提取：
使用移液器吸取临床样本时，避免移液枪头碰到样本管壁。所用移液枪头均为一次性用品，切忌重复使用；
使用带有滤心的移液器枪头，防止样本DNA污染移液器枪管，防止形成气溶胶污染实验室环境；
加入溶液Ⅰ之前，应确保溶液中没有沉淀出现，以免影响提取效率；
加入临床样本时，最好在超净工作台前操作，且将用过的枪头打入到盛有5％次氯酸钠的废液瓶中，以免样品交叉污染,影响以后的PCR检测；
在煮沸样品时，切记不要让沸水溅入到样品管中，建议水沸腾后调低火力；
每次去上清时，尽量去干净,以免影响提取效果；
在做PCR之前，最好将提取的样品离心5秒钟，取样时尽量不要将枪尖碰到管底的沉淀。
PCR扩增：
正确使用移液枪，使用带有滤心的长头移液器枪头，防止样本DNA交叉污染，防止形成气溶胶，防止样本污染试剂；
移液枪头均为一次性用品,切忌重复使用；
每个区域必须用专用仪器、耗材；
进入不同房间必须穿专用工作服及带手套，离开时必须先脱去工作服及手套；
PCR后操作区域房间内的所有耗材及仪器均不能与PCR前区域混合使用；
使用前后均以次氯酸消毒液清理。
导流杂交：
杂交及杂交后清洗溫度（45°C ）；
每次清洗膜后，抽液干净；
确保PCR产物变性成功；
遵守封阻反应温度及时间、酶标反应时间及显色反应时间，确保杂交结果背景正常；
正确使用移液器，移液枪及枪头专用。
DNA提取：
使用移液器吸取临床样本时，避免移液枪头碰到样本管壁。所用移液枪头均为一次性用品，切忌重复使用；
使用带有滤心的移液器枪头，防止样本DNA污染移液器枪管，防止形成气溶胶污染实验室环境；
加入溶液Ⅰ之前，应确保溶液中没有沉淀出现，以免影响提取效率；
加入临床样本时，最好在超净工作台前操作，且将用过的枪头打入到盛有5％次氯酸钠的废液瓶中，以免样品交叉污染,影响以后的PCR检测；
在煮沸样品时，切记不要让沸水溅入到样品管中，建议水沸腾后调低火力；
每次去上清时，尽量去干净,以免影响提取效果；
在做PCR之前，最好将提取的样品离心5秒钟，取样时尽量不要将枪尖碰到管底的沉淀。
PCR扩增：
正确使用移液枪，使用带有滤心的长头移液器枪头，防止样本DNA交叉污染，防止形成气溶胶，防止样本污染试剂；
移液枪头均为一次性用品,切忌重复使用；
每个区域必须用专用仪器、耗材；
进入不同房间必须穿专用工作服及带手套，离开时必须先脱去工作服及手套；
PCR后操作区域房间内的所有耗材及仪器均不能与PCR前区域混合使用；
使用前后均以次氯酸消毒液清理。
导流杂交：
杂交及杂交后清洗溫度（45°C ）；
每次清洗膜后，抽液干净；
确保PCR产物变性成功；
遵守封阻反应温度及时间、酶标反应时间及显色反应时间，确保杂交结果背景正常；
正确使用移液器，移液枪及枪头专用。
HPV基因分型检测临床操作中应注意的问题
